不同插入片段长度对质粒储存稳定性的比较研究

• 作者: 俞晓平 叶子弘 安欣欣 崔海峰 金荣愉
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 质粒 标准分子 稳定性 片段长度
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1359-1368
• 页数: 10页
• 字数: 5706字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2012.12.002

摘要

为比较不同长度的插入片段对质粒标准分子储存稳定性的影响,本研究在pEASY-T3质粒载体的基础上,构建了插入片段长度分别为186 bp(含Cry1Ab)、273 bp(含Cry1Ab和SPS)、880bp(含Cry1Ab、SPS 、fsA CP、35S、NOS和NPTII)的质粒标准分子(以下简称186、273和880).利用荧光定量PCR技术分析3个质粒标准分子中不同基因片段在不同存储温度(-70、-20和4℃)和不同存储时间(1、3、7、14、21、28 d和3、6、12个月)时的稳定性差异.结果表明:Cry1Ab的Cq(quantification cycle)值在质粒186和273中在所有3个温度条件下6个月内均保持稳定,而在12个月时,Cq值快速上升,显著高于其他时期(P＜0.05)；而在质粒880中的Cry1Ab的Cq值在各温度下稳定3个月就快速升高,显著高于其他时期(P＜0.05).SPS的Cq值在质粒273中在3个温度下能稳定保持6个月,SPS、fsA CP、35S、NOS和NPTII片段的Cq值在质粒880中仅能稳定保持3个月.研究结果表明:含较短插入片段的质粒标准分子的稳定性高于含较长插入片段的质粒标准分子,且同一质粒标准分子中不同片段间的稳定性也存在差异.研究为质粒标准分子储存稳定性(保质期)的研究提供科学依据,同时为质粒标准分子候选物的选择提供实验参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔海峰	中国计量学院生命科学学院浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室	22	103	5.0	8.0
2	叶子弘	中国计量学院生命科学学院浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室	59	329	10.0	15.0
3	俞晓平	中国计量学院生命科学学院浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室	101	640	14.0	19.0
4	安欣欣	中国计量学院生命科学学院浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室	4	34	4.0	4.0
5	金荣愉	中国计量学院生命科学学院浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室	3	15	3.0	3.0