用pLNCX2携带人MCPH1基因shRNA重组逆转录病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 刘锦红 袁成福 谭志鑫 陈显兵
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 逆转录病毒载体 shRNA MCPH1基因 宫颈癌
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 16-20
• 分类号: R739.4
• 字数: 3329字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2012.01.004

摘要

目的 建立逆转录病毒介导的MCPH1基因RNA干扰表达体系并观察其在宫颈癌Caski细胞中对MCPH1表达的影响.方法 将人MCPH1基因RNA干扰双链DNA片段重组到逆转录病毒质粒pLNCX2中,构建携带人MCPH1基因RNA干扰的逆转录病毒载体pLNCX2-shRNA-MCPH1,经PT67细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染宫颈癌细胞株Caski细胞,并用G418筛选产生稳定的细胞克隆,用RT-PCR和Western印迹检测细胞中MCPH1 mRNA和蛋白表达的变化.结果 重组逆转录病毒质粒经测序鉴定正确,逆转录病毒感染Caski细胞后用G418筛选出稳定的细胞克隆,RT-PCR和Western印迹检测人MCPH1 mRNA和蛋白表达水平明显低于阴性对照组和未干扰组.结论 携带人MCPH1基因RNA干扰双链DNA片段的逆转录病毒感染Caski细胞后能明显抑制MCPH1 mRNA和蛋白表达,为进一步研究MCPH1在宫颈癌中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谭志鑫	湖北民族学院医学院病理学教研室	45	339	11.0	16.0
2	刘锦红	湖北民族学院医学院病理学教研室	24	111	6.0	9.0
3	陈显兵	湖北民族学院医学院病理学教研室	58	141	6.0	7.0
4	袁成福	湖北民族学院医学院病理学教研室	12	47	3.0	6.0