长蛸ISSR-PCR优化反应体系的建立及优化研究

• 作者: 吴常文 周超 汤永磊 祁鹏志 郭宝英
• 来源期刊: 浙江海洋学院学报：自然科学版
• 学科: 生物学
• 关键词: 长蛸 ISSR 体系优化
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 页码范围: 28-32
• 页数: 5页
• 分类号: Q953.1
• 字数: 3747字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-830X.2012.01.005

摘要

以长蛸DNA为模板,利用单因子试验分别对影响长蛸ISSR-PCR反应的DNA浓度、Taq DNA聚合酶、Mg2＋、dNTPs和引物的浓度进行了优化,并通过梯度PCR确定最适退火温度,最终确定长蛸最佳反应体系和PCR扩增程序为：25μL体系,其中包括Taq DNA聚合酶1.5 U,Mg2＋2 mmol/L,dNTPs 0.15 mmol/L,引物0.4μmol/L,DNA模板量约50 ng确立退火温度为52℃。利用所建立的ISSR-PCR反应体系,通过对24份野生长蛸样本的检验,获得了清晰、重复性好、多态性高的条带,研究结果对于把ISSR标记技术引入研究长蛸不同地理群体遗传多样性和遗传结构具有重要意义。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴常文	浙江海洋学院海洋科学学院浙江省海洋养殖装备与工程技术重点实验室	149	1482	20.0	27.0
2	郭宝英	浙江海洋学院海洋科学学院浙江省海洋养殖装备与工程技术重点实验室	20	73	5.0	7.0
3	祁鹏志	华中农业大学水产学院	4	13	2.0	3.0
4	周超	浙江海洋学院海洋科学学院浙江省海洋养殖装备与工程技术重点实验室	6	20	2.0	4.0
5	汤永磊	浙江海洋学院海洋科学学院浙江省海洋养殖装备与工程技术重点实验室	1	0	0.0	0.0