日本血吸虫钙网蛋白基因的克隆、表达及鉴定

• 作者: 李邦安 汪学龙
• 来源期刊: 热带病与寄生虫学
• 学科: 医学
• 关键词: 钙网蛋白 基因表达 日本血吸虫
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 11-13,16
• 分类号: R532.21
• 字数: 2670字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-2302.2012.01.004

摘要

目的 为了寻找日本血吸虫病新的免疫学候选分子,克隆日本血吸虫钙网蛋白(calreticulin,CRT)编码基因,并进行表达、鉴定.方法 以日本血吸虫cDNA为模板,PCR扩增SjCRT编码基因,并与pGEM-T连接进行亚克隆,双酶切后回收目的基因,并与表达载体pET28a(+)连接,PCR和双酶切鉴定后测序.IPTG诱导表达重组质粒pET28a-SjCRT,进行SDS变性蛋白质电泳和Western-blot分析,用亲和层析纯化获得重组蛋白.结果 成功地构建了重组质粒pET28a-SjCRT,SDS变性蛋白质电泳显示可见一与预期分子量大小相符的特异蛋白条带的表达.Western blotting分析表明,该重组蛋白能被血吸虫感染小鼠阳性血清识别.亲和层析纯化获得SjCRT重组蛋白.结论 重组质粒SjCRT的构建和重组蛋白的表达和纯化,为进一步探讨其在血吸虫病疫苗和诊断中的应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪学龙	安徽医科大学病原生物学教研室	113	471	11.0	16.0
2	李邦安	安徽医科大学病原生物学教研室	2	1	1.0	1.0