日本血吸虫原肌球蛋白cDNA的克隆及其在大肠杆菌中表达

• 作者: 刘述先 宋光承 徐馀信 曹建平
• 来源期刊: 中华医学杂志(英文版)
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫大陆株 原肌球蛋白 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2002,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1465-1469
• 页数: 5页
• 分类号: R38
• 语种: 英文
• DOI: 10.3760/j.issn:0366-6999.2002.10.007

摘要

目的克隆日本血吸虫原肌球蛋白编码基因,并在大肠杆菌中表达.方法抽提日本血吸虫(大陆株)成虫总RNA,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获得编码日本血吸虫原肌球蛋白的cDNA片段,该片段与全序列比较,缺氨基端14个氨基酸.该PCR产物克隆入T 载体并对插入片段进行序列测定后,亚克隆入表达载体pbV220,经琼脂糖凝胶电泳、限制性酶切反应和PCR鉴定后,选择克隆用于温控表达.结果 RT-PCR产物克隆入T载体,序列测定表明,在核苷酸水平和推断和氨基酸水平,与曼氏血吸虫分别有96.5%和98.1的同源性.目的DNA片段亚克隆入原核表达载体pBV220,在大肠杆菌 DH5α中诱导表达.经SDS-PAGE和Western blot分析表明,该非融合表达产物相对分子质量约为32000(32 kDa),日本血吸虫(大陆株)成虫天然原肌球蛋白免疫兔血清能特异识别该重组蛋白.结论编码日本血吸虫原肌球蛋白cDNA克隆及起其在细菌中的表达获得成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋光承	中国预防医学科学院寄生虫病研究所	2	16	2.0	2.0
2	刘述先	中国预防医学科学院寄生虫病研究所	6	69	4.0	6.0
3	曹建平	中国预防医学科学院寄生虫病研究所	1	12	1.0	1.0
4	徐馀信	中国预防医学科学院寄生虫病研究所	1	12	1.0	1.0