兜兰属植物ISSR-PCR反应体系的优化

• 作者: 关萍 张玉晶 李娅迪 江辉 沈文华 陈业
• 来源期刊: 山地农业生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 兜兰属 ISSR-PCR 正交设计 优化
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 297-300
• 分类号: Q781
• 字数: 3587字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0457.2012.04.004

摘要

以兜兰为试材,用改进的CTAB法提取总DNA,采用正交试验设计,分析Mg2+浓度、dNTP浓度、引物浓度和Taq DNA聚合酶用量对ISSR - PCR扩增的影响,并通过梯度PCR确定最佳退火温度,最终建立兜兰ISSR扩增反应体系.最佳反应体系为:25 μL体系中,含10×PCR buffer 2.5 μL、1.5 mmol/L Mg2+、0.15 mmol/L dNTP、0.6μmol/L引物、1.OUTaq酶和40 ng模板DNA.反应程序为:94℃5min,94℃30s,56.2℃45s,72℃1min,共40个循环；72℃延伸7min.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	江辉	贵州大学生命科学学院	8	32	3.0	5.0
2	李娅迪	贵州大学生命科学学院	10	39	4.0	6.0
3	陈业	贵州大学生命科学学院	8	29	3.0	5.0
4	沈文华	贵州大学生命科学学院	8	32	3.0	5.0
5	关萍	贵州大学生命科学学院	52	337	12.0	15.0
6	张玉晶	贵州大学生命科学学院	8	34	4.0	5.0