人偏肺病毒亚克隆的构建与鉴定

• 作者: 刘爱玲 吴润香 贾雪 陆学东
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人偏肺病毒 亚克隆 长片段RT-PCR 重组质粒
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 26-29
• 分类号: R373.1|Q786
• 字数: 2666字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2012.03.008

摘要

目的 从临床标本中扩增人偏肺病毒(hMPV)基因片段进行亚克隆,为进一步全面深入地研究人偏肺病毒奠定基础.方法 根据GenBank中已知的hMPV全基因序列设计引物.收集呼吸道感染住院患儿鼻咽抽吸物697例,提取病毒核酸,运用长片段RT-PCR技术扩增目的片段,切割含目的条带的凝胶进行纯化,并将目的片段连接到PJET1.2/blunt克隆载体,转化感受态细胞TOP10,经含氨苄青霉素的抗生素平板筛选,得到阳性克隆,提取质粒,最后对重组质粒进行PCR鉴定和测序鉴定.结果 随机选取5例所获的阳性条带经PCR和测序鉴定,证实确为hMPV基因片段.结论 成功构建了hMPV基因组亚克隆,可用于后续的实验研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆学东	广东医学院附属深圳福田人民医院检验医学部	103	738	15.0	20.0
2	吴润香	广东医学院附属深圳福田人民医院检验医学部	15	136	7.0	11.0
3	贾雪	北京协和医院基地实验室	2	3	1.0	1.0
4	刘爱玲	深圳市宝安区龙华人民医院检验科	1	1	1.0	1.0