IBRVgB基因TaqMan探针荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 代长春 唐娜 曲光刚 沈志强 王金良 谢金文 郭广君
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛传染性鼻气管炎病毒 gB基因 实时荧光定量PCR TaqMan探针
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1787-1791
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank登陆的IBRV保守基因gB序列，利用分子生物学软件Primer Express3．0分别设计2对特异引物及其相应的TaqMan探针，优化反应体系后，建立牛传染性鼻气管炎病毒TaqMan探针荧光定量PCR检测方法。本方法利用10倍稀释的标准品进行扩增确定该方法的灵敏性，通过对伪狂犬病病毒（PRV）、马立克病病毒（MDV）等检测验证特异性，并进行临床检验。结果显示，建立的IBRVgB基因TaqMan探针荧光定量PCR检测方法的灵敏度为11个拷贝／μL，而且与PRV等非IBRV无交叉反应。本研究所建立的TaqMan探针荧光定量PCR检测方法具有快速、灵敏、准确、等优点，可用于IBRV的检测。