大鼠CRIP2蛋白的表达和分离纯化

• 作者: 王枫 邱建华 高雪
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: CRIP2蛋白 大鼠 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 201-203
• 分类号: Q78
• 字数: 2331字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2012.02.013

摘要

目的:获得大鼠crip2基因片段,并在大肠杆菌中表达、纯化大鼠CRIP2(cysteine-rich intestinal protein 2)蛋白.方法:从大鼠主动脉组织中提取总DNA.RT-PCR扩增出相应大小的criP2 DNA片段,与pGEM-T-easy载体连接后测序；将测序正确的crip2按照BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切位点克隆入原核表达载体pRSET A,将连接产物转化大肠杆菌BL21,挑出阳性克隆,IPTG诱导表达重组的6×His融合蛋白,通过镍柱进行纯化.结果:PCR获得的crip2序列与GenBank报道的一致(为707 bp)；重组融合蛋白在大肠杆菌BL21中以可溶形式高效表达,经SDS-PAGE和Western印迹分析,在相对分子质量为27×103处有特异的蛋白条带,经镍柱纯化后,得到了高纯度的CRIP2融合蛋白.结论:克隆了大鼠crip2基因片段,并在大肠杆菌BL21中高效表达,亲和层析纯化后获得高纯度的CRIP2融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王枫	空军总医院耳鼻喉科	7	13	2.0	3.0
2	高雪	二炮总医院耳鼻喉科	3	2	1.0	1.0