增强型绿色荧光蛋白慢病毒载体标记人牙周膜干细胞的实验研究

• 作者: 兰晶 姜宝岐 崔军 徐欣 文勇 梁晋 马晓妮 黄海云
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 牙周膜干细胞 慢病毒载体 增强型绿色荧光蛋白 成骨能力
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 专栏论著
• 页码范围: 82-86
• 分类号: R781.5
• 字数: 3452字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1182.2012.01.020

摘要

目的 研究增强型绿色荧光蛋白(eGFP)慢病毒载体标记人牙周膜干细胞(PDLSCs)的理想条件,以获得稳定高表达eGFP的人PDLSCs.方法 eGFP慢病毒载体以25、50、100、200和400的感染复数(MOI)转染人PDLSCs 48 h,荧光倒置显微镜及流式细胞术检测各组的转染效率和荧光强度,MTT法评价转染对细胞增殖的影响,检测细胞多向分化能力以及碱性磷酸酶(ALP)的表达状况,从而确定理想的转染条件.结果 eGFP慢病毒作用48 h,不同组的转染效率分别为44.7％、60.9％、71.7％、85.8％、86.9％；除MOI为400时以外,eGFP慢病毒转染对细胞增殖无明显影响；MOI为200时,转染细胞的多向分化能力未受影响,ALP活性与未转染组的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MOI为200作用48h对细胞的增殖分化无明显影响,是eGFP慢病毒载体标记PDLSCs的理想条件,保持了其基本的生物学特性.