正交设计优化苜蓿ISSR-PCR反应体系的研究

• 作者: 李波 李红 李雪婷 潘林 王海军 赵洪波
• 来源期刊: 高师理科学刊
• 学科: 农学
• 关键词: 苜蓿 ISSR 正交设计
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 页码范围: 57-59,65
• 分类号: S54
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-9831.2012.04.018

摘要

以苜蓿基因组DNA为模板,利用正交设计,对影响ISSR反应体系的主要因素(Taq酶、Mg2+、dNTP、引物和模板)从4个水平上进行筛选和优化,建立了适合苜蓿的最佳ISSR反应体系:20μL反应体系中加83.4 nkat Taq酶,2.0 mmol/L Mg2+,10×PCR Buffer 2.0μL,0.4 mmol/L dNTP,0.2 mmol/L引物,2.5 ng DNA模板.PCR扩增反应程序为:94℃预变性4 min(94℃变性1min,45～53℃退火1min,72℃延伸1 min)40个循环,于72℃延伸7min,4℃保存.在此反应体系下,可以得到重复性好、稳定且多态性高的条带.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李波	齐齐哈尔大学生命科学与农林学院	202	918	15.0	22.0
2	李红		232	817	12.0	24.0
3	赵洪波	齐齐哈尔大学生命科学与农林学院	6	80	4.0	6.0
4	李雪婷	齐齐哈尔大学生命科学与农林学院	4	10	3.0	3.0
5	潘林	齐齐哈尔大学生命科学与农林学院	15	86	5.0	8.0