表达A型口蹄疫病毒衣壳蛋白重组腺病毒的构建

• 作者: 于力 周国辉 宋姗姗 王海伟
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: A型口蹄疫病毒 重组腺病毒 衣壳蛋白
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 262-265
• 分类号: S852.65
• 字数: 2615字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2012.04.03

摘要

为构建表达A型口蹄疫病毒(FMDV)衣壳蛋白的重组腺病毒,本研究通过人工合成A型FMDVP1-2A、2B和3C融合基因,将其克隆到腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中,利用E.coli BJ5183内同源重组将目的基因插入腺病毒骨架质粒pAdEasy-1中,获得携带A型FMDV P1-2A-2B-3C基因的重组AdEasy-1.该重组质粒经PacⅠ线性化后转染AD-293细胞,获得重组腺病毒rAd-A09.经PCR检测,该重组腺病毒在传代过程中目的基因稳定存在,病毒滴度在第8代时可达到108.5 TCID50/mL.间接免疫荧光检测和western blot分析表明,rAd-A09在AD-293细胞中产生FMDV的结构蛋白VP0、VP1和VP3.该重组腺病毒的构建为口蹄疫新型疫苗的研究奠定了基础.