内毒素多克隆抗体制备及其在ELISA中应用

• 作者: 刘红艳 周卓晟 罗中捷 郝春慧 郭寅生 黄正
• 来源期刊: 中国公共卫生
• 学科: 医学
• 关键词: 内毒素 多克隆抗体 酶联免疫吸附试验(ELISA)
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1467-1469
• 分类号: R115
• 语种: 中文

摘要

目的 制备抗大肠杆菌精制内毒素的兔多克隆抗体并建立检测内毒素的间接竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)方法.方法 大肠杆菌精制内毒素作为免疫原,采用逐渐加强免疫剂量的方法免疫家兔,制备抗体,将抗体用于ELISA检测精制内毒素;并与复合型内毒素进行反应.结果 随着免疫次数增加,抗血清效价逐渐提高,最后一次免疫后血清效价达到1∶6 400;在包被抗原浓度100 μg/mL和兔多抗稀释比1∶500最佳使用条件下建立间接竞争性ELISA,内毒素浓度与吸光度(A)值成反比例关系,线性回归方程为:y=-0.1 ln(x)+0.765,检测最低内毒素浓度为50ng/mL;兔血清与复合型内毒素反应效价为1∶16000.结论 成功制备出抗精制内毒素兔多克隆抗体,且能与复合型内毒素反应.