人miR-378慢病毒表达载体的构建及鉴定

• 作者: 华东 李莉华 王娟华 茆勇 郭子健 高琪
• 来源期刊: 江苏医药
• 学科: 医学
• 关键词: miR-378 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2012,（17）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 2007-2009
• 分类号: R373
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人miR-378慢病毒表达载体.方法 酶切法从已构建的质粒获得pri-miR-378,克隆于含绿色荧光蛋白( GFP)编码基因的PGCSIL载体,转化感受态细胞,产生重组慢病毒质粒PGCSIL- miR-378,并进行PCR及测序鉴定.将PGCSIL- miR-378、pHelper 1.0和pHelper 2.0三种质粒DNA共转染293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平用逐孔稀释滴度法测定病毒滴度.结果 成功构建miR-378的慢病毒表达载体,测序证实所插入基因序列完全正确.荧光显微镜检测证实PGCSIL-miR378携有正确的miR-378基因,并能在293T细胞中表达.检测病毒滴度为8×108 TU/ml.结论 成功建立了miR-378慢病毒表达系统.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高琪		75	732	15.0	22.0
2	华东	苏州大学附属第四医院肿瘤研究所	54	256	8.0	11.0
3	李莉华	苏州大学附属第四医院肿瘤研究所	51	228	8.0	10.0
4	茆勇	苏州大学附属第四医院肿瘤研究所	22	121	6.0	10.0
5	郭子健	苏州大学附属第四医院肿瘤研究所	32	113	6.0	8.0
6	王娟华	无锡市传染病医院肝病科	14	51	4.0	7.0