小鼠cyclin A2正义和反义真核表达载体的构建及鉴定

• 作者: 付春景 秦文华
• 来源期刊: 中国现代医生
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞周期蛋白A2 正义 反义 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2012,（31）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1-3,7
• 页数: 4页
• 分类号: R346
• 字数: 3466字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建小鼠cyclin A2的正义和反义真核表达载体.方法 采用小鼠胚胎组织取材,提取总RNA.设计引物,采用RT-PCR方法扩增小鼠cyclin A2 mRNA得到cyclin A2的DNA,将此DNA插入pGEM-T载体,转化入JM109感受态细菌.将鉴定得到的重组质粒进行扩增,EcoR Ⅰ酶切后,回收cyclin A2目的片段亚克隆入pcDNA3.1真核表达载体.酶切筛选鉴定重组的真核表达载体pcDNA3.1-cyclin A2.结果 将小鼠基因的开放阅读框(ORF)重组到真核表达载体pcDNA3.1内,用EcoR Ⅰ酶切重组质粒后可得到一接近1660 bp的DNA条带,核酸测序证实和GenBank 所公布序列相符.HindⅢ酶切鉴定重组质粒后,证明分别为正向和反向插入载体的质粒.DNA测序证明构建的真核表达载体pcDNA3.1-cyclin A2的序列是正确的.结论成功构建了小鼠cyclin A2的正义和反义真核表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	付春景	郑州大学基础医学院病理生理学教研室	19	124	7.0	10.0
2	秦文华	中国平煤神马医疗集团总医院病理科	1	1	1.0	1.0