两种酶标抗体制备方法的比较及李斯特菌TASELISA试剂盒性能的优化

• 作者: 刘箐 刘芳 刘雅莉 夏俊芳 孙志博 朱小清 韩舜愈
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 单核细胞增生性李斯特菌 改良过碘酸钠法 碱性磷酸酶 辣根过氧化物酶 三抗体夹心ELISA
• 年，卷（期）: 2012,（15）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 301-306,310
• 分类号: TS207.3
• 语种: 中文

摘要

研制一种低成本、快速、准确的三抗体夹心酶联免疫（Three antibodies sandwich ELISA,TAS-ELISA）检测试剂盒。采用戊二醛法、改良过碘酸钠法分别制备碱性磷酸酶（Alkaline Phosphatase,AP）、辣根过氧化物酶（Horseradish Peroxidase,HRP）标记的山羊抗兔IgG,比较单核细胞增生性李斯特菌（Listeria monocytogenes,LM）TAS-ELISA试剂盒两种酶标抗体的检测效果,并考察了试剂盒的检测灵敏度、特异性、稳定性、保存周期等指标。结果表明,采用改良过碘酸钠法制备的HRP-IgG效果好,克分子比最高可达2.9,酶结合率达27%;试剂盒检测周期6h,检测成本为3.5元/孔,特异性实验、干扰实验、重复性实验、稳定性实验表明采用该方法制备的酶标抗体,特异性好、结果稳定可靠。自制TAS-ELISA试剂盒检测性能可达到商业化试剂盒水平,为该产品的产业化提供了一定的理论依据。