鸡新城疫病毒F基因片段的原核表达及其抗F蛋白单克隆抗体的制备

• 作者: 余为一 孟凡涛 陈芳芳
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 新城疫病毒 F蛋白 原核表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2012,（26）
• 所属期刊栏目: 动物科学·饲料科学
• 页码范围: 12915-12916
• 分类号: S858.31
• 字数: 1731字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2012.26.069

摘要

[目的]制备鸡新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)抗原的单克隆抗体.[方法]克隆和表达了NDV-F蛋白基因的部分片段F306,经杂交瘤技术制备了抗F蛋白的单克隆抗体.[结果]首先根据F基因和载体pGEX-4T-1的多克隆位点自行设计了1对引物,以保存的重组质粒为模板,通过PCR扩增获得长度为306 bp的片段,再将其定向插入pGEX-4T-1,构建重组质粒pGEX-4T-1-F306.其次经原核表达获得大小为35.8 kD的融合蛋白,提纯后免疫Balb/c小鼠.最后,用免疫鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,经ELISA筛选和3次亚克隆获得2株稳定传代和分泌抗NDV-F的抗体的杂交瘤细胞株.连续传代10次后,细胞上清和腹水的抗体效价仍维持在1∶5 124和1∶64 000以上.[结论]获得了2株稳定分泌抗鸡NDV-F抗体的杂交瘤细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余为一	安徽农业大学动物科技学院	121	1025	17.0	25.0
2	陈芳芳	安徽农业大学动物科技学院	26	108	6.0	9.0
3	孟凡涛	安徽农业大学动物科技学院	3	10	2.0	3.0