基因工程实验教学中PCR反应条件的正交优化

• 作者: 刘顺枝 王小兰 田长恩 胡位荣 邓剑锋
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 大肠杆菌 PCR反应 正交设计 条件优化 实验教学
• 年，卷（期）: 2012,（24）
• 所属期刊栏目: 农业教育
• 页码范围: 12276-12278
• 分类号: S182
• 字数: 3688字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2012.24.124

摘要

采用碱裂解法提取大肠杆菌的质粒DNA,检测提取到的DNA浓度和纯度,并以提取的DNA作为PCR反应体系中的模板,采用搜索性正交设计试验法探求PCR反应体系中4个因素(dNTPs、DNA模板、引物和Taq酶)在5个水平上的最适用量,在此基础上,进一步设计细调性正交试验筛选PCR反应的最适条件.结果表明,在20μlPCR反应体系中,DNA模板5 ng/μl,dNTPs 0.25 mmol/L,引物0.6μmol/L,Taq酶1.5 U/μl,Mg2+浓度1.5 mmol/L时,PCR的效果最好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡位荣	广州大学生命科学学院	89	935	19.0	28.0
2	田长恩	广州大学生命科学学院	51	519	11.0	22.0
3	王小兰	广州大学生命科学学院	24	56	4.0	5.0
4	刘顺枝	广州大学生命科学学院	76	879	18.0	28.0
5	邓剑锋	广州大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0