条斑紫菜TPS基因0.6Kb片段的原核表达及抗血清的制备

• 作者: 孙牧君 孟庆芹 徐丽娟 王斌 郭宝太
• 来源期刊: 青岛农业大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: PyTPS基因 原核表达 镍离子亲和层析 重组蛋白 抗血清
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 295-299
• 页数: 5页
• 分类号: Q786|S852.4+3
• 字数: 2968字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/J.ISSN.1674-148X.2013.04.013

摘要

以pET22b为起始载体,构建了条斑紫菜6-磷酸海藻糖合成酶基因(PyTPS)0.6Kb片段的原核表达载体,并命名为pET22b-PyTPS0.6.重组菌BL21 (pET22b-PyTPS0.6)经ITPG诱导后,SDS-PAGE分析显示菌体总蛋白的电泳图谱上有分子量约为23kDa的特异性蛋白条带,即PyTPS基因0.6Kb片段得到了原核表达.用溶菌酶裂解细菌提取包涵体,再利用镍离子亲和层析柱从包涵体中纯化出TPS重组蛋白.用获得的高纯度重组蛋白作抗原免疫家兔获得了抗血清,间接ELISA测定显示一份抗血清的效价为1∶16000,另一份为1∶32000.本研究制备的抗血清为进行转基因植物中PyTPS基因翻译产物的免疫学检测奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐丽娟	青岛农业大学生命科学学院	17	226	8.0	15.0
2	郭宝太	青岛农业大学生命科学学院	16	82	7.0	8.0
3	孟庆芹	青岛农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
4	王斌	青岛农业大学生命科学学院	4	0	0.0	0.0
5	孙牧君	青岛农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0