羊粪沼液微生物总DNA提取方法优化比较研究

• 作者: 冯蕾 古丽·艾合买提 杨新平 秦新政 苏艳 陈竞
• 来源期刊: 新疆农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 沼液 总DNA提取 优化 PCR-DGGE检测
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 页码范围: 2280-2285
• 页数: 6页
• 分类号: S181
• 字数: 4142字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6048/j.issn.1001-4330.2013.12.019

摘要

[目的]目前沼液污泥中99％的微生物不可培养的,为开展羊粪沼液中微生物多样性的研究,须对沼液总DNA进行提取.[方法]研究以总DNA及其PCR产物的琼脂糖电泳结果为判定依据,以SDS结合酚氯仿抽提总DNA的方法为基础,采用逐步增加净化菌泥、溶菌酶裂解以及DNA纯化等优化方法,并测定优化效果.[结果]后续增加的步骤对提高总DNA的提取效率及质量十分有效,所得DNA在得率、大小以及纯净度方面都有所提高,可以满足后续分子实验的要求.[结论]以SDS法为基础,用TENP和PBS洗涤菌泥,添加适量溶菌酶,并适当延长反应时间至3h,再经纯化柱吸附和洗脱的方法可以获得更高质量的羊粪沼液总DNA.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏艳	新疆农业大学动物医学学院	73	201	8.0	10.0
2	陈竞	新疆农业大学动物医学学院	10	29	4.0	5.0
6	冯蕾	新疆农业科学院微生物应用研究所	14	48	4.0	6.0
7	杨新平	新疆农业科学院微生物应用研究所	13	42	4.0	6.0
8	秦新政	新疆农业科学院微生物应用研究所	12	38	4.0	6.0
9	古丽·艾合买提	新疆农业大学动物医学学院	4	7	1.0	2.0