RBPMS不同剪接体的真核表达和亚细胞定位

• 作者: 付洁 叶棋浓 宋海峰 张浩 徐小洁 王瑜 程龙
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 具有多种剪接形式的RNA结合蛋白 剪接体 细胞内定位 RNA结合蛋白 RNA识别基序
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 页码范围: 25-29
• 分类号: Q25|Q78
• 字数: 4586字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2013.01.005

摘要

目的:构建具有多种剪接形式的RNA结合蛋白(RBPMS)基因的真核表达载体,并在真核细胞中表达,确定不同形式的RBPMS在细胞中的定位.方法:采用PCR技术从人卵巢cDNA文库中扩增RBPMS基因的几种完整编码序列(命名为RBP1~RBP4),克隆到带绿色荧光蛋白标签的pEGFP-C1表达载体上,转染人胚肾细胞293T,Western印迹鉴定RBPMS的表达,并利用激光共聚焦显微镜观察RBPMS不同剪接体在细胞中的定位.结果:限制性内切酶分析和DNA序列测定表明构建的重组表达载体正确,Western印迹实验证明RBP1~RBP4表达成功.通过激光共聚焦显微镜观察,RBP1/4围绕胞核在核膜的周围呈聚集状分布;RBP2则在细胞质和细胞核中均有分布,但会出现斑点状聚集;RBP3呈半月状紧密分布在细胞核周围;RBPMS中的RNA识别基序缺失后,这种现象消失,与空载体对照类似,在细胞核和细胞质中均有分布.结论:构建并表达了RBPMS基因的真核表达载体,RBPMS不同剪接体及RNA识别基序缺失后具有不同的亚细胞分布模式,提示具有不同的功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋海峰	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	66	327	9.0	15.0
2	张浩	军事医学科学院生物工程研究所	59	336	8.0	16.0
3	叶棋浓	军事医学科学院生物工程研究所	138	519	11.0	17.0
4	徐小洁	军事医学科学院生物工程研究所	51	112	6.0	7.0
5	付洁	军事医学科学院生物工程研究所	17	39	3.0	5.0
6	程龙	军事医学科学院生物工程研究所	26	79	4.0	8.0
7	王瑜	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	4	4	2.0	2.0