PRDX3真核表达载体构建及亚细胞定位

• 作者: 叶棋浓 张春霞 张菊会 王恩群 王琳 程龙 麦宏旭
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 过氧化物还原酶3 克隆 真核表达 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 801-804,808
• 页数: 5页
• 分类号: R346|Q75
• 字数: 3752字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2016.10.006

摘要

目的：构建带FLAG标签的过氧化物还原酶3（peroxiredoxin3，PRDX3， PRX3）的真核表达载体，并对其在人舌癌SCC15细胞中的定位进行检测。方法以乳腺文库为模板，PCR扩增带有FLAG标签的PRDX3基因片段，并将扩增产物插入到PCDH空载体中，构建成PCDH－FLAG－PRDX3，质粒测序正确后瞬时转染入人胚肾293T细胞， Western免疫印迹检测克隆载体的表达情况，细胞免疫荧光实验检测PRDX3的亚细胞定位。结果双酶切和测序结果表明，PCDH－FLAG－PRDX3真核表达载体构建成功，转染293T细胞后成功表达了FLAG－PRDX3融合蛋白；细胞免疫荧光显示FLAG－PRDX3蛋白定位于舌癌SCC15细胞的细胞质中，不存在于细胞核内。结论成功构建了带FLAG标签的PRDX3真核表达载体，并检测其定位于舌癌SCC15细胞质中，为进一步明确PRDX3在舌癌发生发展中的功能及分子机制奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	叶棋浓	军事医学科学院生物工程研究所	138	519	11.0	17.0
2	程龙	军事医学科学院生物工程研究所	26	79	4.0	8.0
3	王恩群	安徽医科大学附属安庆市立医院口腔科	21	82	6.0	8.0
4	张春霞	安徽医科大学附属安庆市立医院口腔科	7	16	2.0	3.0
5	张菊会	安徽医科大学附属安庆市立医院口腔科	5	33	3.0	5.0
6	麦宏旭	大连医科大学肿瘤干细胞研究院	2	1	1.0	1.0
7	王琳	解放军316医院内分泌科	11	93	4.0	9.0