三种转染试剂介导pGPU6/GFP/Neo真核表达载体转染鸡胚成纤维细胞的比较研究

• 作者: 何星 兰志勇 李华 胡莹 邵雁 陈力 顾子春 马菁晶
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 转染,质粒DNA/遗传学 鸡胚成纤维细胞/细胞学 绿色荧光蛋白质类 细胞毒性
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 660-665
• 页数: 6页
• 分类号: Q782
• 字数: 4737字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2013.06.012

摘要

目的:采用不同转染试剂介导pGPU6/GFP/Neo质粒转染鸡胚成纤维细胞UMNSAH/DF-1,以获得最优化的方法.方法:分别采用不同剂量(1.25 μl、2.0 l、2.5 μl)的Lipofectamin2000、Gbfectene-Elite及HilyMax转染试剂介导1μg质粒进行转染,观察其转染效率,测定其转染细胞存活率.结果:HilyMax组的转染效率为(86.85％±2.32％),较Lipofectamin2000组(48.33％±3.24％)、Gbfectene-Elite组(37.35％±5.41％)高(F=18.882,P＜0.05);其中,HilyMax 2.5μl组的转染效率最高为(90.53％±1.15％).Lipofectamin2000组的细胞存活率(65.76％±5.78％)明显低于HilyMax组(89.54％±0.86％)、Gbfectene-Elite组(82.45％±3.56％) (F=90.676,P＜0.05).结论:HilyMax对于鸡胚成纤维细胞具有最好的转染效率和最低的细胞毒性,推荐使用2.5 μl HilyMax:1μg质粒进行鸡胚成纤维细胞的转染.