华东葡萄VpWDR基因的克隆、表达及亚细胞定位分析

• 作者: 张军科 曾爱玲 武杰
• 来源期刊: 果树学报
• 学科: 农学
• 关键词: 华东葡萄 WD40基因 RACE克隆 抗病基因 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 种质资源·遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 354-360,后插2
• 页数: 8页
• 分类号: S663.1
• 语种: 中文

摘要

[目的]探索中国葡萄野生种抗白粉病候选基因VpWDR与白粉病抗性的相关性.[方法]以中国野生华东葡萄(Vitis pseudoreticulata)叶片为植物材料,采用RACE技术对华东葡萄抗白粉病株系‘白河-35-1’叶片cDNA文库测序获得的WDR基因EST序列片段进行全长克隆,利用实时荧光定量PCR技术分析VpWDR在华东葡萄抗白粉病株系‘白河-35-1’叶片中受白粉菌侵染后的表达变化,采用基因枪介导的瞬时转化技术检测VpWDR表达产物在洋葱表皮细胞内的定位.[结果]获得了华东葡萄VpWDR mRNA全长1 577 bp,开放阅读框1 377 bp,3'UTR 138 bp,5'UTR 62 bp,编码458个氨基酸,理论等电点为5.07,预测分子量为51.7 kDa;核酸和编码的氨基酸序列同源性分析结果表明,VpWDR属于WD40蛋白基因家族,并命名为Vp WDR;在人工接种葡萄白粉菌后的葡萄叶片进行基因表达分析,表明该基因在葡萄叶片中受白粉菌诱导先上调表达,再回到原始水平,最大值出现在接种后12h,表达量约为内参基因β-Actin的2.8倍；此外,亚细胞定位结果表明该基因编码的蛋白定位于细胞核、细胞质和细胞膜,无亚细胞特异性分布.[结论]VpWDR蛋白定位于细胞核、细胞质和细胞膜位.并且VpWDR基因对白粉菌产生响应,从而推测该基因可能参与葡萄白粉菌侵染过程中的抗病反应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张军科		40	340	9.0	17.0
2	武杰		3	2	1.0	1.0
3	曾爱玲		1	0	0.0	0.0