重组猪IFNα的构建及原核可溶性表达研究

• 作者: 孙加燕 尹忠宝 张存亮 户国达 蔡家利 陈文毫
• 来源期刊: 重庆理工大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 猪α-干扰素 基因工程药物 生物药物 兽药
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 23-27
• 页数: 5页
• 分类号: S858.28
• 字数: 2820字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8425(z).2013.02.005

摘要

使用原核表达系统可溶性表达猪α-干扰素,并进行纯化和鉴定.根据Gene Bank中报道的猪α-干扰素成熟肽基因序列设计引物,以猪肝脏细胞基因组DNA为模板,用PCR方法扩增猪α-干扰素成熟肽基因,并将其定向克隆到原核表达载体pET32a+中,转化大肠杆菌DH5a.阳性克隆经PCR鉴定、双酶切鉴定以及测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21进行诱导表达.对表达产物进行SDS-PAGE分析、镍柱亲和层析纯化、Western-blot鉴定.结果表明:成功构建了猪α-干扰素原核表达载体pET32a+-poIFN-α；表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约3.8 ×104的位置出现了目的蛋白条带,与预期相符；Western-blot鉴定显示有特异性条带出现.实现了重组猪α-干扰素的可溶性表达,获得了纯度较高的重组猪α-干扰素,为进一步研究其药物作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡家利	重庆理工大学药学与生物工程学院	37	96	5.0	6.0
2	尹忠宝	重庆理工大学药学与生物工程学院	2	5	2.0	2.0
3	孙加燕	重庆理工大学药学与生物工程学院	2	9	2.0	2.0
4	户国达	重庆理工大学药学与生物工程学院	1	2	1.0	1.0
5	张存亮	重庆理工大学药学与生物工程学院	3	6	2.0	2.0
6	陈文毫	重庆理工大学药学与生物工程学院	1	2	1.0	1.0