VEGF基因RNA干扰质粒的构建与鉴定

• 作者: 丁琴 叶湘湘 宋艳萍 陈中山
• 来源期刊: 华南国防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血管内皮生长因子 RNA干扰 重组质粒 脉络膜新生血管
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 299-304
• 页数: 6页
• 分类号: R394-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2595.2013.05.003

摘要

目的 构建干扰血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因RNA表达的重组质粒.方法 设计3组针对VEGF基因的核糖核酸干扰(RNA interference,RNAi)序列,应用基因重组技术克隆入载体pcDNA 3.1中,重组质粒分别命名为pcDNA 3.1-VEGF-LH1、pcDNA 3.1-VEGF-LH2和pcDNA 3.1-VEGF-LH3,用DNA直接测序法和双酶切法鉴定构建的重组质粒.结果 DNA测序证实克隆入载体pcDNA 3.1(-)中的序列正确,双酶切证实RNA干扰序列正确插入载体pcDNA 3.1(-).结论 成功构建针对VEGF基因的RNAi质粒,为进一步研究该RNAi质粒在脉络膜新生血管形成中的作用奠定了基础.