RNA聚合酶Ⅱ启动子驱动的长双链RNA干扰载体的构建与验证

• 作者: 孙朕 曹柯 樊宝良 黄培华
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 生物学
• 关键词: RNA干扰 RNA聚合酶Ⅱ启动子 长双链RNA 核酶
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1-5,190
• 页数: 6页
• 分类号: Q946.5
• 语种: 中文

摘要

为了探索构建由RNA聚合酶Ⅱ型启动子驱动、能有效避免干扰素反应的表达长双链RNA的RNA干扰载体,试验在转录单元两端各添加了一个自剪切核酶序列,在转录后切成RNA出核所必要的5’帽子和3'polyA尾,以绿色荧光蛋白(EGFP)基因为报告基因插入2个核酶之间作为试验载体,以表达红色荧光蛋白基因的载体作转染效率校准,通过瞬间转染对荧光蛋白的表达情况进行观察和RT-PCR分析.结果表明:在转染效率基本一致的情况下,试验组未观察到绿色荧光;2个核酶能够完全自剪切,试验组细胞质中有EGFP mRNA的存在,但与正常对照组相比下降了46.1％.说明研究设计的载体达到了延迟表达RNA出核的目的,为用该载体表达长双链RNA时在其出核之前被Dicer酶有效切割成小双链RNA从而避免其出核引起干扰素反应提供了时间保障.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	樊宝良		18	30	3.0	5.0
2	曹柯		1	0	0.0	0.0
3	孙朕		3	3	1.0	1.0
4	黄培华		1	0	0.0	0.0