美洲南瓜SSR-PCR反应体系的优化及引物筛选

• 作者: 李柱刚 王珣 邹伶威 韩俊岩
• 来源期刊: 黑龙江大学自然科学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 美洲南瓜 SSR-PCR 优化体系 引物筛选
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 环境科学与生命科学
• 页码范围: 386-389,395
• 页数: 5页
• 分类号: Q331
• 语种: 中文

摘要

应用单因素实验和L16(44)正交设计对影响美洲南瓜SSR-PCR的主要参数进行优化,建立适合美洲南瓜SSR-PCR反应的最佳体系.结果表明,不同水平的各因素对PCR反应结果均有影响,优化后美洲南瓜SSR-PCR反应体系(20μL)为:1.00μnnol·L-1引物、0.150 mmol·L-1 dNTP、0.9 U Taq酶、50 ng DNA模板.运用优化后的反应体系对美洲南瓜进行多态性引物的筛选,从300对引物中筛选出68对扩增条带清晰、多态性丰富的SSR引物.