天蚕素AD和Buforin II表达载体的改良和融合蛋白表达条件优化

• 作者: 扈进冬 李哲 李纪顺 杨合同 赵晓燕 陈泉
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 大肠杆菌 天蚕素AD Buforin II 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 1195-1199
• 页数: 5页
• 分类号: Q939.9
• 字数: 3939字
• 语种: 中文

摘要

为提高重组大肠杆菌表达天蚕素AD和BuforinⅡ融合蛋白的表达效率，研究表达菌株、质粒稳定性和诱导条件对天蚕素AD和BuforinⅡ融合蛋白表达的影响。通过SDS-PAGE分析目的蛋白占全菌总蛋白的含量，确定大肠杆菌BER2566为表达菌株；利用基因工程技术，构建卡那霉素抗性的表达质粒pET （K ）-T rx-CAD-BuforinII ，提高质粒稳定性和蛋白表达效率；优化了IPTG浓度、诱导时机和诱导时间等诱导条件，确定菌体浓度为OD600＝0.8时， IPTG浓度为0.8 mmol · L -1，诱导时间为5 h ，目的蛋白表达量最高，可达到全菌总蛋白含量的50％以上。