截短ALT1蛋白的获得及其多克隆抗体的制备

• 作者: 王鹏 胥文春 谌海兰 黄美容
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: ALT1 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 281-285
• 页数: 5页
• 分类号: R575.1-3
• 字数: 2538字
• 语种: 中文

摘要

目的 原核表达、纯化截短ALT1蛋白,制备ALT1多克隆抗体.方法 利用pCold TF载体原核表达系统,IPTG诱导,表达经生物信息学分析含有两个编码ALT1抗原表位的ALT1 N端1～115个氨基酸序列的基因片段,依次经镍(Ni)离子亲和柱纯化、HRV 3C蛋白酶酶切、二次镍离子亲和柱纯化和分子筛柱层析得到不带标签的截短ALT1纯蛋白,用纯蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.结果 经测序证实,成功构建了截短pCold TFT-ALT1表达载体.获得纯度达90％的不带标签的截短ALT1重组蛋白,制备了效价达4.0×106的ALT1多克隆抗体,经Western blot鉴定,能特异性地识别ALT1抗原和肝细胞裂解液.结论 成功获得高质量的截短ALT1无标签蛋白及其特异的多克隆抗体,为ALT1的免疫学检测试剂的研发提供了依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胥文春	重庆医科大学临床检验诊断学教育部重点实验室	33	103	6.0	9.0
2	黄美容	遵义医学院附属医院输血科	16	57	4.0	7.0
3	王鹏	河南省人民医院核医学科	6	18	2.0	4.0
4	谌海兰	重庆医科大学临床检验诊断学教育部重点实验室	9	20	3.0	4.0