靶向血管内皮细胞因子受体3小干扰RNA腺病毒表达载体的构建

• 作者: 吕志诚 张锋军 杨文元 苏芝兰
• 来源期刊: 大连医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: VEGFR-3基因 RNA干扰 腺病毒 表达载体
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 139-142
• 页数: 4页
• 分类号: R321
• 字数: 3091字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11724/jdmu.2013.02.10

摘要

目的 构建靶向血管内皮细胞因子受体3(VEGFR-3)的小干扰RNA重组腺病毒表达载体.方法 将构建的靶向VEGFR-3特异性小干扰RNA真核表达载体pGenesil-siRNA的启动子及siRNA序列克隆入穿梭质粒pAdTrack,将质粒线性化处理后转化入pAdEasy.重组腺病毒栽体线性化处理后转染HEK293细胞,包装重组腺病毒,并进行PCR鉴定、病毒滴度测定；扩增后感染结肠癌LoVo细胞并进行Western blotting检测VEGFR-3蛋白的表达.结果 双酶切鉴定及测序证实pAdTrack-pG-siRNA及pAd-VEGFR3-siRNA质粒构建正确,扩增纯化测定重组病毒pAd-VEGFR3-siRNA的滴度为5.6 × 109 pfu/mL.病毒感染结肠癌LoVo细胞后测定VEGFR-3蛋白表达明显降低.结论 靶向VEGFR-3小干扰RNA的腺病毒载体构建成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕志诚	兰州军区兰州总医院于四科	26	68	4.0	7.0
2	苏芝兰	甘肃武威市医院消化科	4	10	2.0	3.0
3	杨文元	兰州军区兰州总医院于四科	6	15	2.0	3.0
4	张锋军	兰州军区兰州总医院于四科	4	9	2.0	3.0