人β防御素3与植物巴西甜蛋白基因密码子的优化及其在毕氏酵母中的表达

• 作者: 徐婷婷 暴元元 李春丽 赵卫东 赵青君 郑振宇 陈锐博
• 来源期刊: 河南农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 防御素 甜蛋白 基因合成 克隆表达 活性检测
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 77-82
• 页数: 6页
• 分类号: Q81
• 字数: 3963字
• 语种: 中文

摘要

根据人β防御素3和植物甜蛋白des-pGlul-Brazzein的氨基酸序列,按照酵母密码子的偏爱性,合成了14段末端具有粘合位点的核苷酸序列,经连接、PCR扩增,使人β防御素3和植物甜蛋白des-pG lul-Brazzein的编码序列通过1段序列(含凝血酶切割位点)连接成为嵌合基因,将其插入到pPIC9K载体中,构建重组表达载体pPIC9K-hBD3-Bra.SalⅠ,BglⅡ单酶切后,分别电击转化到毕赤酵母GS115中,构建野生型和乙醇氧化酶缺陷型酵母工程菌株GS115-pPIC9K-hBD3-Bra.筛选鉴定后,以体积分数为0.5％的甲醇进行诱导,缺陷型工程菌株表达的目的蛋白约占上清蛋白的90％,纯度较高,野生型工程菌株表达的目的蛋白约占上清蛋白的57.8％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李春丽	河南农业大学牧医工程学院	33	229	7.0	14.0
2	郑振宇	河南农业大学牧医工程学院	33	47	5.0	5.0
3	暴元元	河南农业大学牧医工程学院	2	3	1.0	1.0
4	赵青君	河南农业大学牧医工程学院	3	3	1.0	1.0
5	徐婷婷	河南农业大学牧医工程学院	3	4	1.0	1.0
6	陈锐博	河南农业大学牧医工程学院	3	3	1.0	1.0
7	赵卫东	河南农业大学牧医工程学院	17	44	5.0	5.0