小峰熊蜂蜂毒磷脂酶A2基因的克隆及表达分析

• 作者: 吴杰 高丽娇 黄家兴
• 来源期刊: 昆虫学报
• 关键词: 小峰熊蜂 磷脂酶 基因克隆 序列分析 基因表达
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 974-981
• 语种: 中文

摘要

磷脂酶A2 (phospholipase A2,PLA2)是蜂毒主要成分,也是蜂毒的主要过敏原,在熊蜂个体和群体防御方面具有重要功能.为了探究熊蜂A2基因的生物学功能,本研究以小峰熊蜂Bombus hypocrita为材料进行了蜂毒PLA2基因的克隆、鉴定与表达特性分析.结果表明:该基因全长为2 272 bp,GenBank登录号为KF214771,由4个外显子和3个内含子组成,编码区(CDS)长为543 bp,共编码180个氨基酸残基.氨基酸序列相似性分析显示,成熟的小峰熊蜂PLA2(含有136个氨基酸)与其他蜂类PLA2的氨基酸序列相似性较高,均包含10个保守的半胱氨酸残基、1个保守的Ca2+结合位点和1个酶活性中心.基于PLA2氨基酸序列的系统进化树分析表明,熊蜂属Bombus与蜜蜂属Apis在不同分支上,属单系群,且蜜蜂属分化较早.荧光定量PCR结果表明,PLA2基因在小峰熊蜂各日龄均有表达,且随日龄增长,表达量呈先上升后下降的趋势,10日龄时出现峰值,其表达量显著高于其他日龄(P＜0.05).半定量PCR结果表明,PLA2基因在毒腺、卵巢、中肠中表达量较高,在足、触角、食道腺中表达量较低,在脂肪体、肌肉、神经、气管、复眼、脑中未表达.本研究探明了小峰熊蜂PLA2的基因结构及其表达特性,丰富了熊蜂PLA2的生物学基础,为进一步深入研究熊蜂PLA2生物学功能和作用机制以及开发蜂毒生物制剂等鉴定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴杰	中国农业科学院蜜蜂研究所农业部授粉昆虫生物学重点开放实验室	125	1173	20.0	29.0
2	黄家兴	中国农业科学院蜜蜂研究所农业部授粉昆虫生物学重点开放实验室	46	482	13.0	20.0
3	高丽娇	中国农业科学院蜜蜂研究所农业部授粉昆虫生物学重点开放实验室	2	31	2.0	2.0