副溶血弧菌总蛋白双向电泳体系的建立

• 作者: 傅玲琳 王彦波 王瑞
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 副溶血弧菌 总蛋白 双向电泳(2-DE)
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 食品安全与检测
• 页码范围: 146-155
• 语种: 中文

摘要

目的:建立并优化副溶血弧菌总蛋白质双向电泳技术体系,为后续差异蛋白质组学研究奠定基础.方法:以副溶血弧菌为研究对象,对比研究样品制备、裂解液配方、IPG胶条长度、IPG胶条pH范围、水化上样方式、等电聚焦程序、上样量和二向胶浓度等因素,优化双向电泳体系.结果:采用超声破碎与TCA沉淀相结合的样品制备方法,能够获得较高的蛋白提取率;使用17cm pH4～7的IPG胶条,主动水化上样,上样量100嵋,上样体积300 μL,适当延长除盐时间(2.5 h)和等电聚焦总电压时间积(80 000 vhr),采用12.5％的二向分离胶,能得到较高的电泳图谱分离度和分辨率.结论:本研究建立的副溶血孤菌总蛋白质双向电泳体系具有较高的可操作性和重现性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王彦波	浙江工商大学食品与生物工程学院浙江省食品安全重点实验室	61	314	10.0	14.0
2	傅玲琳	浙江工商大学食品与生物工程学院浙江省食品安全重点实验室	48	219	9.0	11.0
3	王瑞	浙江工商大学食品与生物工程学院浙江省食品安全重点实验室	2	11	2.0	2.0