家兔胆固醇酯转移蛋白基因克隆及其真核表达载体的构建

• 作者: 刘恩岐 张鹏 王艳丽 郭世文
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 胆固醇酯转移蛋白 克隆 序列分析 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 方法学
• 页码范围: 837-840
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|R392.11
• 字数: 2866字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7694/jldxyxb20130441

摘要

目的:克隆家兔胆固醇酯转移蛋白(CETP)基因,构建其真核表达载体,研究CETP基因的结构与功能,为进一步研究CETP在动脉粥样硬化(As)中的作用机制提供参考.方法:采用TRIzol提取家兔肝组织总RNA,采用RT-PCR方法将RNA逆转录为cDNA,以cDNA为模板,用LA Taq酶进行PCR扩增,克隆出CETP基因,将CETP cDNA片段克隆至pMD19-T载体上,对重组的CETP-pMD19-T测序后,登录GenBank进行序列比对,利用nnPredict软件分析预测CETP的二级结构.将CETP cDNA片段克隆至pcDNA3.1真核表达载体上,对重组质粒进行PCR及酶切鉴定.结果:测序及序列比对显示与M27486基因序列98％相符；家兔CETP基因cDNA全长1 659 bp,编码序列(CDs区)长1 494 bp,编码498个氨基酸.CETP的二级结构以α螺旋结构为主,相对分子质量为142119.4,pI为4.91.结论:成功克隆了家兔CETP基因,并成功构建了其真核表达载体,明确了CETP的二级结构.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭世文	西安交通大学医学院第一附属医院神经外科	115	406	10.0	15.0
2	张鹏	西安交通大学医学院第一附属医院神经外科	121	797	12.0	24.0
4	王艳丽	西安交通大学医学院实验动物中心	43	318	11.0	16.0
5	刘恩岐	西安交通大学医学院实验动物中心	30	245	8.0	15.0