贝类包拉米虫和派琴虫二重荧光定量PCR方法的建立

• 作者: 刘加波 庞耀珊 张艳芳 罗思思 范晴 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 包拉米虫 派琴虫 二重实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 页码范围: 49-53
• 页数: 5页
• 分类号: S944.344
• 字数: 4411字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中包拉米虫和派琴虫保守基因序列，用Primer Express 3.0软件设计合成了两对引物和两条TaqMan探针。对反应条件和试剂浓度进行优化，建立了能够同时检测包拉米虫和派琴虫的二重荧光定量PCR方法。该方法对包拉米虫和派琴虫的检测敏感性达到200个模板拷贝数；此外抗干扰能力强，对包拉米虫和派琴虫不同模板浓度进行组合，仍可有效同时检测到这两个原虫。该方法对单孢子虫、马尔太虫、副溶血弧菌、溶藻弧菌和河弧菌等病原体的检测，结果全为阴性。研究建立的包拉米虫和派琴虫荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点，可用于贝类包拉米虫和派琴虫感染的检测。