贝类派琴虫实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用

• 作者: 刘建 吴绍强 李海艳 李西峰 林祥梅 梅琳 贾广乐 郑腾 韩雪清
• 来源期刊: 渔业科学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 派琴虫 贝类 实时荧光PCR 检测
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 58-63
• 页数: 6页
• 分类号: S944.4
• 字数: 4571字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7075.2009.05.010

摘要

选择派琴虫保守的核糖体DNA ITS-2区域设计引物和TaqMan探针,通过对反应体系和反应条件进行优化,建立了实时荧光定量PCR检测派琴虫的方法.所构建方法检测质粒模板DNA的动态范围为2.6×101～2.6×107拷贝,敏感度可检测到26拷贝质粒DNA,而且与包拉米原虫、隐孢子虫等其他寄生性原虫无交叉反应,也不受贝类组织DNA的干扰.利用本研究所建立的方法对来自我国山东、福建等不同沿海海域的30份贝类样品进行检测,检出阳性样品3份.研究表明,本研究所构建的派琴虫实时荧光定量PCR检测方法具有快速、灵敏和特异等优点,可满足国内养殖场及进出口水生动物携带派琴虫的检测需要.