兔出血症病毒ZB分离株VP60基因克隆、截短表达与活性鉴定

• 作者: 张志美 张颖 徐倩倩 李峰 杨丽梅 沈志强 王艳萍 郭时金 马力
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 兔出血症病毒 VP60基因 克隆 截短表达
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 57-61
• 页数: 5页
• 分类号: S852.651|Q786
• 字数: 3526字
• 语种: 中文

摘要

为分析兔出血症病毒地方分离株的变异情况,并获得活性良好的兔出血症病毒基因工程抗原,对兔出血症病毒ZB分离株的VP60基因进行了克隆、序列分析与原核表达.ZB株分离病毒与GenBank中的6株RHDV VP60基因的核苷酸序列同源性在92.5％～97.9％之间,参照ZB株分离病毒VP60基因序列,设计合成一对特异性引物,PCR扩增了876 bp的VP60基因片段.将目的片段定向克隆至pET30a表达载体中,经鉴定正确后,重组质粒转化BL21表达菌,经IPTG诱导后获得了以包涵体形式表达的重组蛋白,重组蛋白纯化后,Western blot检测表明具有良好的抗原性与特异性.