西部马脑脊髓炎病毒实时荧光RT-PCR检测方法建立及标准质控品制备

• 作者: 乔彩霞 刘环 吴亚琼 吴清民 张伟 张鹤晓 蒲静 谷强 高志强
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 西部马脑炎病毒 实时荧光RT-PCR 标准质控品
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 80-84
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3567字
• 语种: 中文

摘要

选取西部马脑炎病毒代表株进行序列比对分析，选择保守区域，设计合成引物和TaqMan探针。经对反应体系和条件进行优化，建立了检测西部马脑炎病毒的实时荧光RT-PCR检测方法，应用建立的方法对西部马脑炎病毒核酸、东部马脑炎病毒核酸、马动脉炎病毒核酸、马疱疹病毒1型核酸、马流感病毒H3N8亚型核酸进行检测，结果表明建立的方法只能检出西部马脑炎病毒核酸，与另外4种病毒核酸无交叉反应。进一步通过体外转录制备了西部马脑炎病毒McMillan株7442~10011的cRNA片段，经拷贝数计算、稀释、分装、均匀性和稳定性检验后，作为质控品对建立的方法进行评价。结果显示，所建立的方法其分析灵敏度可达10拷贝。对197份进口马血样品检测用时仅4小时，表明该检测技术快速、灵敏、特异。因此，本研究建立的方法可作为技术储备用于进口马匹的疫病筛查。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘环		51	203	7.0	11.0
2	蒲静		34	111	6.0	8.0
3	张伟		48	119	7.0	8.0
4	高志强		48	143	7.0	9.0
5	张鹤晓		43	280	9.0	15.0
6	乔彩霞		27	128	7.0	9.0
7	谷强	中国农业大学动物医学院	31	138	6.0	11.0
9	吴亚琼		2	2	1.0	1.0