PAX2慢病毒表达载体的制备及鉴定

• 作者: 吴玉斌 宫亮 李里
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: PAX2基因 慢病毒载体 293T细胞
• 年，卷（期）: 2013,（15）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用
• 页码范围: 2859-2862
• 分类号: R329.2+3
• 语种: 中文

摘要

目的 构建大鼠PAX2慢病毒表达载体,以期在大鼠肾脏中高效、稳定表达.方法 设计引物引入Age I酶切位点,使用PCR方法从质粒pcDNA3.1-PAX2中扩增小鼠PAX2基因的编码区序列,对所扩增出的目的片段回收纯化.用In-Fusion技术将Age Ⅰ内切酶消化后目的片段交换连接入Age Ⅰ酶切的pGC-FU载体,构建PAX2慢病毒表达载体pGC-FU-PAX2.酶切验证并测序正确后,将质粒pGC-FU-PAX2与慢病毒辅助包装载体共转染293T细胞,Western-blot验证PAX2在转染293T细胞中表达.结果 通过PCR扩增获得了PAX2基因,将PAX2克隆到慢病毒转移质粒pGC-FU中,并在293T细胞中包装产生慢病毒颗粒.结论 成功构建了PAX2慢病毒表达载体,为进一步从分子水平探讨PAX2功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴玉斌	中国医科大学附属盛京医院小儿肾脏风湿免疫科	122	469	11.0	15.0
2	李里	辽宁医学院辽宁医学院附属第一医院儿科	8	19	3.0	4.0
6	宫亮	辽宁医学院附属第一医院耳鼻喉咽喉科	27	57	4.0	6.0