野油菜黄单胞菌葡萄糖激酶基因的克隆与表达

• 作者: 张连英 杨正久 董红梅 钱静 陆光涛
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 野油菜黄单胞菌 葡萄糖激酶 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 14-17
• 页数: 4页
• 分类号: Q75
• 字数: 4565字
• 语种: 中文

摘要

葡萄糖激酶催化葡萄糖磷酸化生成葡萄糖-6-磷酸,是糖酵解的第一步反应,在野油菜黄单胞菌(Xcc)利用碳源代谢及其致病性中起重要作用.为了初步鉴定Xcc葡萄糖激酶基因功能,为研究其利用碳源相关代谢及致病性提供理论依据,以pQE30为表达载体,采用常规PCR技术对野油菜黄单胞菌Xcc8004基因组上注释为葡萄糖激酶的3个基因(XC_1166、XC_1223和XC_1976)进行了克隆与表达,该3个基因在大肠杆菌JM109中有较高表达量,经Ni2+金属层析柱纯化后分别得到带有3个His的融合蛋白XC_1166-His6、XC_1223-His6和XC_1976-His6,分析表明仅XC_1976的表达产物具有葡萄糖激酶活性,为Xcc8004葡萄糖激酶基因,经测定XC_1976-His6的最适反应温度为45℃,最适pH值为7.1,最适反应条件下比活力为(380.6±1.123) U/mg.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆光涛	广西大学生命科学与技术学院	27	96	6.0	9.0
2	张连英	遵义医药高等专科学校医学技术系	16	35	2.0	5.0
3	钱静	遵义医药高等专科学校医学技术系	14	10	2.0	2.0
4	杨正久	遵义医药高等专科学校医学技术系	19	20	3.0	3.0
5	董红梅	遵义医药高等专科学校医学技术系	10	10	2.0	2.0