人类VIM基因的克隆和真核表达载体的构建

• 作者: 崔莉 王振刚 高圆
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: VIM基因 基因克隆 真核表达
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1615-1617,1614
• 分类号: Q75|Q78
• 语种: 中文

摘要

目的:构建VIM(Vimentin)基因的真核表达载体,以深入研究VIM的功能及其在相关疾病中的作用.方法:从人cDNA文库中,以RT-PCR方法扩增出1401bp的VIM编码区片段,胶回收后连接入T.载体,测序鉴定.再用Hind Ⅲ和BamHI双酶切,将VIM编码区片段定向克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,酶切鉴定重组质粒.将重组质粒转染NIH3T3细胞,分别以RT-PCR和Western Blot方法检测VIM的mRNA表达和蛋白表达.结果:将人VIM编码区基因成功克隆到真核表达载体pcDNA3.1中；继而转染NIH3T3细胞后,RT-PCR和Western Blot结果显示细胞可以表达VIM的mRNA和蛋白.结论:成功构建pcDNA3.1-VIM的真核表达载体,为进一步研究VIM基因的功能以及其在相关疾病中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王振刚		59	175	7.0	11.0
2	崔莉		29	42	4.0	4.0
3	高圆		20	32	4.0	4.0