重组褐藻胶裂解酶基因工程菌的高密度培养

• 作者: 李安雪 汪立平 赵勇
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 褐藻胶裂解酶 高密度培养 分批补料发酵 重组大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 202-205,222
• 分类号: TS201.1
• 语种: 中文

摘要

在5L发酵罐中,利用分批补料培养技术高密度培养含表达褐藻胶裂解酶重组质粒的工程菌E.coli BL21,生产褐藻胶裂解酶.利用单因素实验对补料培养基中碳源浓度进行优化,利用单因素实验和单纯形优化法对诱导时间和IPTG浓度进行了优化,从而得到最适高密度发酵条件为:发酵培养基为葡萄糖10g/L,酵母提取物5g/L,蛋白胨20g/L；补料培养基为葡萄糖150g/L,蛋白胨20g/L,酵母提取物10g/L,4～10h的流加速率为100mL/h,10～16h的加速率设定为200mL/h；诱导时间为4.5h,IPTG终浓度为0.60mmol/L,发酵过程中溶解氧控制在30％ ～40％,pH控制在7.0～7.2.IPTG未诱导时,最终发酵液中菌液稀释200倍后,OD600达0.696,菌体浓度达65.38g/L；IPTG诱导后菌液稀释200倍后,OD600达0.457,菌体浓度达60.15g/L,是分批发酵的8.43倍；菌体进行超声波破碎后制备粗酶液,酶活力达26.37U/mL,是分批发酵的5.48倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵勇	上海海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心	111	1316	20.0	30.0
2	汪立平	上海海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心	35	392	12.0	18.0
3	李安雪	上海海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心	2	3	1.0	1.0