乙型脑炎病毒C蛋白编码基因重组质粒构建与表达

• 作者: 冯国和 王志峰 翟永贞
• 来源期刊: 山西医药杂志
• 关键词: 脑炎病毒,日本 病毒蛋白质类 蛋白质C CHO细胞
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 7-9
• 页数: 3页
• 字数: 2688字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建流行性乙型脑炎病毒(JEV)C蛋白编码基因重组子并鉴定.方法 以JEV SA14-14-2株总RNA为模板,应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增JEV C蛋白编码基因,克隆至pMD19-T Simple载体测序.为便于分析JEV C蛋白编码基因重组子在哺乳动物细胞中的表达,在JEV C蛋白编码基因5′端附加FLAG 序列,并亚克隆至pcDNA 3.1(+)载体中,构建重组子pJc并经酶切及DNA测序分析.脂质体法将pJc转染中华仓鼠卵巢(CHO)细胞.免疫荧光检测转染的CHO细胞中JEV C蛋白分布与表达.结果 pJC经BamH I/EcoR I酶切释出的插入子片段(414 bp)分别与预期结果相符合.所编码的融合蛋白主要分布于胞质,少量分布于胞膜.结论 pJC成功构建,转染的CHO细胞可表达JEV C蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯国和		88	426	12.0	16.0
2	翟永贞		25	42	4.0	5.0
3	王志峰		3	3	1.0	1.0