p58IPK基因RNA干扰载体的构建及鉴定

• 作者: 关振宏 张欢欢 李影 王甲慧
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: p58IPK pSUPER载体 RNA干扰 Real-time PCR
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 页码范围: 102-105
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65|Q78
• 字数: 2938字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13327/j.jjlau.2014.1840

摘要

针对p58IPK基因设计2个靶位点，并根据靶位点合成2对寡聚核苷酸序列，退火后连接到经 BglⅡ和HindⅢ双酶切的pSUPER载体上，分别构建抑制p58IPK蛋白基因表达的p58IPK-siRNA1和p58IPK-siRNA2载体并鉴定其功能。重组构建的pSUPER-p58IPK载体经酶切鉴定及基因序列分析，结果表明60个碱基成功插入到预计位点，并且序列完全一致。将构建的2个RNAi载体分别转染到293T细胞中，通过Real-time PCR和Western blotting的方法检测其对p58IPK的抑制效果，结果证明p58IPK-siRNA2可显著抑制细胞中p58IPK基因的表达，可为进一步研究p58IPK在禽流感病毒感染中的作用机制奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李影	吉林农业大学动物科学技术学院	69	301	8.0	13.0
2	关振宏	吉林大学人兽共患病教育部重点实验室人兽共患病研究所	13	32	3.0	4.0
3	张欢欢	吉林大学人兽共患病教育部重点实验室人兽共患病研究所	16	161	6.0	12.0
4	王甲慧	吉林农业大学动物科学技术学院	2	4	2.0	2.0