荧光定量R T-PC R检测鸡新城疫病毒方法的建立及应用

• 作者: 屈素洁 张步娴 李军 梁媛 粟艳琼 胡杰 邹联斌 陈芳芳 韦显凯
• 来源期刊: 上海畜牧兽医通讯
• 关键词: 新城疫病毒 病毒检测 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 19-21
• 页数: 3页
• 字数: 2922字
• 语种: 中文

摘要

针对新城疫基因序列保守区域设计1对特异性引物和1条特异性的探针，通过构建重组阳性标准质粒的方法，构建重组质粒作为阳性标准品，建立了检测NDV 核酸的荧光定量PCR方法，优化反应体系和条件后进行特异性、敏感性、重复性试验。结果显示，该检测方法特异性强，与其它禽源病毒如鸡传染性支气管炎（IBV ）、传染性喉气管炎病毒（ILTV ）、传染性法氏囊病毒（IBDV）、禽流感病毒（AIV）、马立克氏病毒（MDV）均不发生交叉反应；该方法可检测到3．9×101拷贝/mL的病毒核酸，与常规RT-PCR相比，敏感性高100倍；重复性试验的变异系数小于3％。结果表明，本研究所建立的Real-time RT-PCR检测方法特异性强、灵敏度高、可重复性好，可用于新城疫的定量检测。