建立人促甲状腺素受体α亚基HEK293T细胞稳定表达株

• 作者: 唐恭顺
• 来源期刊: 生物医学工程学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 促甲状腺素受体 慢病毒 人胚肾细胞 甲亢
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 146-151
• 页数: 6页
• 分类号: R581.1|Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.7507/1001-5515.20140029

摘要

为研究抗甲状腺多肽的特异性与亲和力,本研究建立了人促甲状腺素受体(TSHR)α亚基(hTSHRA)稳定表达株.构建hTSHRA到慢病毒质粒GV218上形成GV218 hTSHRA,挑取GV218-hTSHRA构建物阳性大肠杆菌克隆,提取DNA测序结果与人TSHRA序列比对,100％吻合.结果显示:GV218 hTSHRA转染到HEK 293T后,Western blot显示,HEK 293T细胞提取蛋白出现52 kD的hTSHRA目的条带.GV218-hTSHRA、辅助质粒在HEK 293T细胞中包装后,HEK 293T细胞表达绿色荧光蛋白.收取浓缩的包装病毒,qPCR测定滴度达到了2×108 TU/mL.再将包装病毒转染到HEK 293T细胞中,hTSHRA即表达在HEK 293T细胞上,细胞传代后hT-SHRA仍然稳定表达.结果表明获得GV218 hTSHRA包装质粒,并建立了hTSHRA-HEK 293T稳定表达株,为研究抗甲状腺多肽与人TSHRα亚基特异性与亲和力提供了必要的实验材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐恭顺		18	67	5.0	7.0