CD41-42突变型β地中海贫血重组载体pEGFP-C2-CD41-42的构建及其稳定转染HeLa细胞模型的建立

• 作者: 庞莉莉 曾雅畅 李慕军 陈悦 陈萍 陈静
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: β地中海贫血 CD41-42突变基因 重组载体 HeLa细胞
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 257-260,后插2
• 页数: 5页
• 分类号: R556
• 字数: 3189字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20140209

摘要

目的:构建CD41-42突变型β地中海贫血重组载体pEGFP-C2-CD41-42和HeLaCD41-42细胞模型,为β地中海贫血CD41-42突变型细胞、小鼠模型建立及进一步基因治疗提供依据.方法:在β地中海贫血CD41-42突变的纯合子患者外周血中提取DNA,PCR法扩增含有βCD41-42的β-珠蛋白基因片段.将PCR产物βCD41-42珠蛋白基因克隆到pEGFP-C2载体中,用脂质体2000将pEGFP-C2-βCD41-42质粒转染HeLa细胞,观察转染后βCD41-42在HeLa细胞中荧光表达情况.RT-PCR法检测βCD41-42在HeLa细胞中的表达.结果:重组质粒pEGFP-C2-βCD41-42转染HeLa细胞24 h后细胞发出绿色荧光,G418筛选后,有大量荧光表达.RT-PCR扩增得到227 bp的特异性条带,而稳定转染pEGFP-C2空质粒的HeLa细胞中不表达特异性条带.结论:成功构建β地中海贫血pEGFP-C2-βCD41-42突变基因重组载体,并成功构建HeLaCD41-42细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈静	广西医科大学第一附属医院广西地中海贫血防治重点实验室	114	515	11.0	16.0
2	陈萍	广西医科大学第一附属医院广西地中海贫血防治重点实验室	69	413	12.0	16.0
3	李慕军	广西医科大学第一附属医院广西地中海贫血防治重点实验室	116	677	13.0	21.0
4	陈悦	广西医科大学第一附属医院广西地中海贫血防治重点实验室	59	331	8.0	16.0
5	曾雅畅	广西医科大学第一附属医院广西地中海贫血防治重点实验室	31	125	6.0	9.0