功能未知基因LOC410296的表达载体构建及小鼠抗血清制备

• 作者: 周建平 张学清 林仲武 沈丽萍 王治东 陈英 陈虹
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 生物学
• 关键词: LOC401296 功能未知基因 原核表达 真核表达 蛋白纯化 抗血清
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 212-215
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3273字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2014.03.012

摘要

目的：为深入研究功能未知基因LOC401296，首先获取其全长序列，实现LOC401296分子的真核和原核表达，并制备针对 LOC401296蛋白的抗血清。方法采用 PCR 方法克隆 LOC401296编码区全长序列，利用pET28B和pCMV-Myc质粒构建LOC401296原核表达和真核表达载体，用异丙基硫代半乳糖苷（ IPTG）诱导目的蛋白原核表达，目的蛋白经纯化、复性后免疫小鼠制备抗血清。结果 PCR克隆得到LOC401296编码区全长序列，成功构建LOC401296原核及真核表达载体，IPTG诱导目的蛋白在大肠杆菌体内表达，用纯化蛋白免疫小鼠获得抗人LOC401296蛋白血清， ELISA检测抗血清效价达1∶64000，Western印迹证实LOC401296真核表达载体成功表达且抗血清特异性良好。结论获得LOC401296基因编码区全长序列，成功构建了LOC401296基因表达载体，分别在大肠杆菌和真核细胞内实现LOC401296蛋白原核表达和真核表达，获得小鼠抗人LOC401296蛋白抗血清，为LOC401296基因功能研究奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周建平	军事医学科学院毒物药物研究所	26	80	5.0	7.0
2	林仲武	军事医学科学院科技部	12	26	3.0	4.0
3	王治东	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	25	87	6.0	8.0
4	张学清	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	23	96	7.0	8.0
5	沈丽萍		4	21	2.0	4.0
9	陈虹	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	1	2	1.0	1.0