人 ENO1基因的克隆及其重组逆病毒载体ENO1-pBABE-Puro 的构建

• 作者: 刘会玲 朱晓艳 李海红 王千千 王海琳 王秋香 祝秉东
• 来源期刊: 实用癌症杂志
• 学科: 医学
• 关键词: ENO1基因 PCR 质粒构建 逆转录病毒载体 宫颈癌
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 4-7
• 页数: 4页
• 分类号: R73-36
• 字数: 3563字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-5930.2014.01.002

摘要

目的：构建含人烯醇化酶1（ENO1）目的基因的重组逆转录病毒载体。方法从人癌细胞中提取总RNA合成cDNA， PCR扩增目的基因ENO1，用sal1和BamH1双酶切ENO1及pbabe质粒，然后用连接酶将ENO1插入pbabe中，最后将重组质粒转化感受态E．coli DH 5α大肠杆菌，提取质粒进行酶切鉴定及 DNA 测序。结果重组逆转录病毒载体ENO1-pBABE-Puro测序结果与GenBank上的序列完全一致，克隆的目的基因已经正确插入到逆转录病毒载体pB-ABE-Puro中。结论成功构建了含有ENO1目的基因的重组逆转录病毒载体，为进一步观察ENO1在肿瘤发生、发展中的作用及与宫颈癌细胞化疗敏感性的相关性做好准备。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘会玲	甘肃省人民医院妇科	23	48	4.0	5.0
2	祝秉东	兰州大学基础医学院	28	121	7.0	9.0
3	王海琳	甘肃省人民医院妇科	48	206	7.0	12.0
4	王千千	兰州大学第一临床医学院	4	7	1.0	2.0
5	李海红	兰州大学第一临床医学院	2	0	0.0	0.0
6	王秋香	兰州大学第一临床医学院	2	0	0.0	0.0
7	朱晓艳	兰州大学第一临床医学院	2	9	1.0	2.0